Bioss 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
產(chǎn)品優(yōu)勢
①檢測效果好：特異性強、靈敏度高，對細(xì)胞凋亡的結(jié)果進(jìn)行檢測，陰陽性分群效果明顯。
②操作簡便快捷：只需分別加入緩沖液、熒光標(biāo)記物Annexin V和核染色液PI即可；且染色僅需15-20分鐘。
③檢測方法多樣：可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。
④質(zhì)量保證：原材料自主研發(fā)，嚴(yán)格質(zhì)量控制，無憂售后。
試劑盒簡介
Annexin V細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V Apoptosis Detection Kit)是用熒光素FITC/AF647標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷脂酰絲氨酸的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒。還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC/Annexin V-AF647可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色/紅色熒光。
BA00101試劑盒檢測結(jié)果
Annexin V-FITC試劑盒的流式檢測效果參考圖1，熒光顯微鏡檢測效果參考圖2
圖1
圖1.細(xì)胞用本試劑盒染色后流式細(xì)胞儀檢測效果驗證圖。Jurkat細(xì)胞用10μM喜樹堿(Camptothecin)作用4小時后，未經(jīng)染色(A)、僅用本試劑盒中的PI進(jìn)行染色(B)、僅用本試劑盒中的Annexin V-FITC進(jìn)行染色(C)、用本試劑盒中的Annexin V-FITC和PI進(jìn)行雙染(D)。從圖中可以看出，未經(jīng)染色的是雙陰性細(xì)胞(A)，僅PI染色后出現(xiàn)了預(yù)期的PI染色陽性的細(xì)胞，僅Annexin V-FITC染色出現(xiàn)了預(yù)期的Annexin V-FITC染色陽性的細(xì)胞，Annexin V-FITC和PI雙染出現(xiàn)了預(yù)期的僅Annexin V-FITC染色陽性的凋亡細(xì)胞和雙陽性的壞死細(xì)胞。實測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
圖2
圖2. Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)染色效果圖。圖中綠色熒光為Annexin V-FITC染色細(xì)胞(圖a)，紅色熒光為碘化丙啶染色細(xì)胞(圖b)。僅被綠色熒光染色的為凋亡細(xì)胞，被綠色和紅色熒光雙染的是壞死細(xì)胞(圖c)，未被熒光染色的為正常細(xì)胞。
Annexin V檢測原理
Annexin V是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，簡稱PS)高親和力特異性結(jié)合。在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷脂酰絲氨酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。此方法被公認(rèn)為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。
