“梯度膠的各種試劑濃度讓人頭暈眼花;一次配四塊膠,手忙腳亂一上午時間就過完了;
可以保溫杯里泡枸杞,卻拯救不了配膠試劑影響身體;
辛辛苦苦制完膠,怎么又出現(xiàn)漏膠/凝膠太慢/膠孔殘缺,今天又要加班了;
條帶歪歪扭扭,難入導師法眼,唉,又要重新來過?!?/span>這是不是也是你在做WB時的感嘆?
快來看看Bioss全新推出的Precast Gels (Bis-Tris, MOPS)蛋白預制膠,Bioss助您解決“膠”慮,讓WB條帶更加清晰。
產(chǎn)品信息:
預制膠選擇指南:
在蛋白實驗中,通常使用固定濃度膠和梯度膠兩種,與固定濃度膠相比,顯然梯度膠具有更大優(yōu)勢。首先,梯度膠的分離范圍更寬,可以同時分離較大范圍分子量的蛋白質(zhì)。梯度膠的頂部孔徑較大,底部孔徑較小,分子量較大的蛋白質(zhì)可以在凝膠頂部大孔徑部分得到分離,同時分子量較小的蛋白質(zhì)可以在凝膠底部小孔徑部分得到分離。
另一個優(yōu)點是梯度膠可以分辨分子量相差較小,在固定濃度膠中不能分辨的蛋白質(zhì)。電泳過程中,蛋白質(zhì)在梯度膠中遷移,經(jīng)過的孔徑越來越小,直到凝膠的孔徑不能通透,這樣電泳過程中蛋白質(zhì)就被濃縮,集中在一個很窄的區(qū)帶中。而分子量略小的蛋白質(zhì)可以遷移得更靠前一些,被集中在略前面的區(qū)帶中。由于梯度凝膠孔徑逐步變小,在蛋白質(zhì)不能通透的孔徑附近對蛋白有濃縮作用,所以電泳后形成很窄的區(qū)帶,可以分辨出分子量相差較小的蛋白質(zhì)。
在蛋白分離范圍相同的情況下,梯度膠的選擇主要取決于目的蛋白的大小,雖然都可以分離10-250 kD的蛋白,但濃度為4-12%的梯度膠對55 kD以上的蛋白分離效果更好,而濃度為4-20%的梯度膠則更利于分離55 kD以下的蛋白。凝膠分離范圍
產(chǎn)品優(yōu)勢及常見問題解答
產(chǎn)品優(yōu)勢:
1.方便:即開即用,無需配制溶液和灌膠操作,并附送足量的電泳緩沖液,簡化操作步驟,縮短實驗時間,每天都有新結(jié)果;
2.快捷:電泳時間短,在150V電壓下,電泳40-50分鐘即可完成,再也不用熬夜做WB啦;
3.安全:無需接觸有毒、刺激性試劑,和屏住呼吸加試劑say byebye;
4.兼容性強:兼容目前市場各種電泳槽,無論是BIORAD,天能還是君意東方,通通百搭;
5.應用廣泛:SDS變性及非變性電泳一膠搞定;
6.重復性好:通過全自動、大規(guī)模的凝膠灌注技術,品質(zhì)穩(wěn)定,保證每片膠之間良好的重復性,重復實驗補數(shù)據(jù)也不怕;
7.結(jié)果清晰:獨特的凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰,銳利,均勻,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液,可以提高凝膠穩(wěn)定性并避免蛋白在電泳過程中的再修飾。條帶平整、清晰、銳利,無邊緣效應,讓你的WB結(jié)果張張精品。
常見問題解答:
1.指示劑偏斜
可能原因:電泳槽漏液
解決辦法:調(diào)整膠板位置,檢查密封條。
2.蛋白條帶拖尾
可能原因:樣品溶解不佳或者降解
解決辦法:樣品加熱,離心取上清或重新制備新鮮樣品。
3.指示劑呈倒三角狀,即兩邊低、中間高,形成峰頂
可能原因:內(nèi)、外槽電泳液量不夠
解決辦法:補滿內(nèi)槽電泳液,外槽電泳液補至2/3高度。
4.指示劑出現(xiàn)弧度
可能原因:底部出口被電泳槽上膠條部分覆蓋或者膠板底部沒卡緊
解決辦法:調(diào)整膠板位置,避免底部出口和膠條重合。
5.上半部分蛋白條帶無端消失
可能原因:內(nèi)槽或樣品被蛋白酶污染
解決辦法:清洗實驗相關試劑、儀器,避免被蛋白酶污染。
6.WB曝光圖蛋白條帶不完整
可能原因:濕轉(zhuǎn)時海綿里面有氣泡沒有排干凈或者夾子沒夾緊
解決辦法:將海綿里面的氣泡排干凈;調(diào)整夾子的位置。
7.樣品條帶在凝膠中擴散狀
可能原因:樣品含鹽類過多
解決辦法:采用透析或者超濾除鹽。